The effect of testosterone replacement on intramedullary, inguinal and visceral fat in ovariectomized rats / Efeito da reposição de testosterona na gordura intramedular, inguinal e visceral em ratas ovariectomizadas

Abstract Objective The present article aims to evaluate the impact of testosterone treatment on the expansion of visceral, subcutaneous and intramedullary adipose tissue of ovariectomized rats and the visceral and subcutaneous fat expression of peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) gamma. Methods In total 48 female Wistar rats were castrated and randomly divided into 6 treatment groups: group E2 was submitted to estradiol 5 μg/day; group T, to testosterone 5 μg/day; group E2+ T, to estradiol 5 μg/day + testosterone 5 μg/day; group TT, to testosterone 30 μg/day; group E2+ TT, to estradiol 5 μg/day+ testosterone 30 μg/day; and placebo was administered to group P. After 5 weeks, the rats were euthanized, the inguinal and visceral adipose tissues were harvested, weighted, and had their PPAR gamma expression evaluated by reverse transcription quantitative polymerase chain reaction (RTqPCR). The right femurs were harvested and histologically prepared to performthe number count of the intramedullary adipocytes. Results The expansion of visceral fat tissue was much higher in the TT group when compared with other treated groups (p < 0.001). The TT group also showed a higher expansion of inguinal fat (p < 0.01), and groups E2 +T and E2+ TT presented lower growth compared to the P group (p < 0.01). The number of femur intramedullary adipocytes only showed significant differences between groups TT and E2 + TT (p < 0.05). The expression of PPAR gamma showed no differences among the groups. Conclusion The use of testosterone in high doses leads to an important expansion in both visceral and inguinal adipose tissues. Association with estradiol exerts an expansion-repressive effect on the visceral and inguinal adipose tissues.

Resumo Objetivo Este artigo tem como objetivo avaliar o impacto do tratamento com testosterona na expansão dos tecidos adiposos visceral, subcutâneo e intramedular de ratas ovariectomizadas e a expressão de receptores ativados por proliferadores de peroxissoma (RAPPs) gama nas gorduras visceral e subcutânea. Métodos No total, 48 ratas Wistar foram castradas e divididas aleatoriamente em 6 grupos de tratamento: o grupo E2 recebeu estradiol 5 μg/dia; o grupo T, testosterona 5 μg/dia; o grupo E2 + T, estradiol 5 μg/dia + testosterona 5 μg/dia; o grupo TT, testosterona 30 μg/dia; o grupo E2 + TT, estradiol 5 μg/dia + testosterona 30 μg/dia; e o grupo P recebeu placebo. Após 5 semanas, as ratas foram submetidas a eutanásia, o tecido adiposo inguinal e visceral foi coletado, pesado, e se avaliou a expressão dos RAPP gama por reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (RCP-TRq). Os ossos do fêmur direito foram colhidos e processados histologicamente para contagem de números de adipócitos intramedulares. Resultados A expansão do tecido adiposo visceral foi muito maior no grupo TT quando comparado a outros grupos tratados (p < 0,001). O grupo TT também apresentou maior expansão da gordura inguinal (p < 0,01), e os grupos E2 +T e E2 + TT apresentaram menor crescimento em relação ao grupo P (p < 0,01). O número de adipócitos intramedulares no fêmur mostrou apenas diferenças significativas entre os grupos TT e E2 + TT (p < 0,05). A expressão de RAPP gama não mostrou diferenças entre os grupos. Conclusão O uso de testosterona emaltas doses leva a uma importante expansão nos tecidos adiposos visceral e inguinal. A associação com o estradiol exerce um efeito repressivo de expansão nos tecidos adiposos visceral e inguinal.

Effect of testosterone on proliferation markers and apoptosis in breasts of ovariectomized rats / Efeito da testosterona em marcadores de proliferação e apoptose em mamas de ratas ovariectomizadas

Abstract Objective To investigate the action of testosterone (T), isolated or associated with estradiol benzoate (EB), on the proliferation markers and apoptosis of breasts of ovariectomized rats. Methods A total of 48 castrated female Wistar rats were divided into 6 groups, and each of them were submitted to one of the following treatments for 5 weeks: 1) control; 2) EB 50 mcg/day + T 50 mcg/day; 3) T 50mcg/day; 4) EB 50 mcg +T 300 mcg/day; 5) T 300 mcg/day; and 6) EB 50 mcg/day. After the treatment, the mammary tissue was submitted to a histological analysis and immunoexpression evaluation of proliferation markers (proliferating cell nuclear antigen, PCNA) and apoptosis (caspase-3). Results There was a statistically significant difference among the groups regarding microcalcifications and secretory activity, with higher prevalence in the groups treated with EB. There was no difference among the groups regarding atrophy, but a higher prevalence of atrophy was found in the groups that received T versus those that received EB +T. There was a difference among the groups regarding the PCNA (p = 0.028), with higher expression in the group submitted to EB +T 300 mcg/day. Regarding caspase-3, there was no difference among the groups; however, in the group submitted to EB +T 300 mcg/day, the expression was higher than in the isolated T group. Conclusion Isolated T did not have a proliferative effect on the mammary tissue, contrary to EB. Testosterone in combination with EB may or may not decrease the proliferation, depending on the dose of T.

Resumo Objetivo Investigar a ação da testosterona (T) isolada ou associada ao benzoato de estradiol (EB) na proliferação e apoptose de mamas de ratas ovariectomizadas. Métodos Um total de 48 ratas Wistar castradas foram divididas em 6 grupos, e cada um foi submetido a um dos seguintes tratamentos durante 5 semanas: 1) controle; 2) BE 50 mcg/dia + T 50mcg/dia; 3) T 50 mcg/dia; 4) BE 50 mcg + T 300mcg/dia; e) T 300 mcg/dia; e f) BE 50 mcg/dia. Após o tratamento, o tecido mamário foi submetido a análise histológica e avaliação de imunoexpressão de marcadores de proliferação (antígeno nuclear de células proliferantes, PCNA) e apoptose (caspase-3). Resultados Houve diferença estatisticamente significante entre os grupos com relação às microcalcificações e à atividade secretora, com maior prevalência nos grupos tratados com BE. Não houve diferença entre os grupos quanto à atrofia, mas houve maior prevalência de atrofia nos grupos que receberam T versus os que receberam BE+ T. Houve diferença entre os grupos quanto ao ANCP (p= 0,028), com maior expressão no grupo BE+ T 300 mcg/dia. Com relação à caspase-3, não houve diferença entre os grupos, mas, no grupo BE+ T 300 mcg/dia, a expressão foi maior do que no grupo de T isolada. Conclusão A T isolada não apresentou efeito proliferativo do tecido mamário, contrariamente ao EB. A T em associação ao EB pode diminuir ou não a proliferação, a depender da dose de T.

Is the expression of the components of the carotid matrix of rats influenced by estrogen, progestin and tibolone? / A expressão dos componentes da matriz carotídea de ratos é influenciada pelo estrogênio, progestagênio e tibolona?

Abstract Objective To analyze the effects of estrogen alone or in combination with progestogens and tibolone (TIB) on the expression of the extracellular matrix metalloproteinases 2 and 9 (MMP-2 and MMP-9), of perlecan, and of heparanase (HPSE) of the vascular walls of the carotid arteries. Methods A total of 30 250-day-old ovariectomized Wistar rats were orally treated for 5 weeks with: a) 1 mg/kg of estradiol benzoate (EB); b) EB + 0.2 mg/kg of medroxyprogesterone acetate (MPA); c) EB + 0.2mg/kg of norethisterone acetate (NETA); d) EB + 2 mg/kg of dydrogesterone (DI); e) 1 mg/kg of TIB; f) placebo (CTR). Following treatment, the expression of mRNA for MMP-2, MMP-9, and HPSE was analyzed by realtime polymerase chain-reaction (PCR), and the expression of MMP-2, of MMP-9, of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP-2), and of perlecan was quantified by immunohistochemistry in the carotid arteries. Results The groups showed significant differences on mRNA HPSE expression (p = 0.048), which was higher in the EB, EB + MPA, and TIB groups. There was no statistically significant difference in mRNA MMP-2 or MMP-9 expression. The immunohistochemical expression of MMP-2, of TIMP-2, of MMP-9, of HPSE, and of perlecan showed no differences between groups. Conclusion Estradiol alone or associated with MPA and TIB treatment can increase mRNA HSPE expression of the walls of the carotid arteries in ovariectomized rats.

Resumo Objetivo Analisar os efeitos do estrogênio isolado ou em combinação com progestogênios e tibolona (TIB) na expressão das metaloproteinases 2 e 9 da matriz extracelular (MMP-2 e MMP-9), da perlecan e da heparanase (HPSE) das paredes vasculares das artérias carótidas. Métodos Trinta ratas Wistar ovariectomizadas com 250 dias de idade foram tratadas oralmente por 5 semanas com: a) 1 mg/kg de benzoato de estradiol (EB); b) EB + 0,2 mg/kg de acetato de medroxiprogesterona (MPA); c) EB + 0,2mg/kg de acetato de noretisterona (NETA); d) EB + 2 mg/kg de didrogesterona (DI); e) 1 mg/kg de TIB; f) placebo (CTR). Após o tratamento, a expressão de mRNA para MMP-2, MMP- 9, e HPSE foi analisada por reação em cadeia da polimerase (RCP) em tempo real, e a expressão de MMP-2, MMP-9, inibidor tecidual de metaloproteinase 2 (TIMP-2), e de perlecan foi quantificado por imunohistoquímica em artérias carótidas. Resultados Os grupos apresentaram diferenças significativas na expressão do mRNA HPSE (p = 0,048), sendo maiores nos grupos EB, EB + MPA e TIB. Não houve diferença estatisticamente significativa nas expressões de mRNA MMP-2 ou MMP-9. A expressão imunohistoquímica de MMP-2, TIMP-2, MMP-9, HPSE e perlecan não mostrou diferenças entre os grupos. Conclusão O estradiol isolado ou associado ao tratamento com MPA e TIB pode aumentar a expressão de mRNA HSPE nas paredes das artérias carótidas em ratas ovariectomizadas.

Expression of e-cadherin and wnt pathway proteins betacatenin, apc, tcf-4 and survivin in gastric adenocarcinoma: clinical and pathological implication / Expressão da e-caderina e das proteínas da via de sinalização wnt betacatenina, apc, tcf-4 e survivina no adenocarcinoma gástrico: implicações clínica e patológica

ABSTRACT Background: Gastric cancer is the fifth most frequent cancer and the third most common cause of cancer-related deaths worldwide.It has been reported that Wnt/ betacatenin pathway is activated in 30-50% of these tumors. However,the deregulation of this pathway has not been fully elucidated. Aim: To determine the expression of E-cadherin, betacatenin, APC, TCF-4 and survivin proteins in gastric adenocarcinoma tissues and correlate with clinical and pathological parameters. Method: Seventy-one patients with gastric adenocarcinoma undergoing gastrectomy were enrolled. The expression of E-cadherin, betacatenin, APC, TCF-4 and survivin proteins was detected by immunohistochemistryand related to the clinical and pathological parameters. Results: The expression rates of E-cadherin in the membrane was 3%; betacatenin in the cytoplasm and nucleus were 23,4% and 3,1% respectively; APC in the cytoplasm was 94,6%; TCF-4 in the nucleus was 19,4%; and survivin in the nucleus 93,9%. The expression rate of E-cadherin was correlated with older patients (p=0,007), while betacatenin with tumors <5 cm (p=0,041) and APC with proximal tumors (p=0,047). Moreover, the expression of TCF-4 was significantly higher in the diffuse type (p=0,017) and T4 tumors (p=0,002). Conclusion: The Wnt/betacatenin is not involved in gastric carcinogenesis. However, the high frequency of survivin allows to suggest that other signaling pathways must be involved in the transformation of gastric tissue.

RESUMO Racional: O câncer gástrico encontra-se entre as principais neoplasias malignas do mundo sendo o quinto mais incidente e o terceiro em relação ao índice de mortalidade. Acredita-se que a via Wnt/betacatenina esteja ativada em 30-50% desses tumores, porém a desregulação dela ainda não está completamente esclarecida. Objetivo: Avaliar a imunoexpressão das proteínas E-caderina, betacatenina, APC, TCF-4 e survivina em tecidos de adenocarcinoma gástrico e correlacioná-las com as variáveis clínicas dos doentes e anatomopatológicas do tumor. Método: Foram coletados os dados clínicos e anatomopatológicos dos prontuários de 71 doentes com adenocarcinoma gástrico submetidos à gastrectomia. O material obtido na operação foi submetido à análise imunoistoquímica e a frequência da expressão de cada proteína pôde ser analisada de acordo com a sua localização na célula e relacionada com as variáveis clinicopatológicas. Resultados: A graduação percentualda expressão e da localização das proteínas foi a seguinte: E-caderina em 3% na membrana; betacatenina em 23,4% no citoplasma e 3,1% no núcleo; APC em 94,6% no citoplasma; TCF-4 em19,4% no núcleo; e survivina em 93,9% no núcleo. Houve relação entre expressão da proteína E-caderina com a idade mais avançada (p=0,007); betacatenina com tumores <5 cm de diâmetro (p=0,041);APC com tumores proximais (p=0,047); e TCF-4 com tipo difuso da classificação de Lauren (p=0,017) e com o grau de penetração tumoral (p=0,002). Conclusão: A via Wnt/betacatenina não está envolvida na carcinogênese gástrica. Porém, a frequência elevada de survivina permite sugerir que outras vias sinalizadoras devam estar envolvidas na transformação do tecido gástrico.

Histological analysis of the repair of dural lesions with silicone mesh in rats subjected to experimental lesions / Análise histológica do reparo de lesões da dura com tela de silicone em ratos submetidos à lesão experimental

ABSTRACT Objective To evaluate inflammatory reaction, fibrosis and neovascularization in dural repairs in Wistar rats using four techniques: simple suture, bovine collagen membrane, silicon mesh and silicon mesh with suture. Methods Thirty Wistar rats were randomized in five groups: the first was the control group, submitted to dural tear only. The others underwent durotomy and simple suture, bovine collagen membrane, silicon mesh and silicon mesh with suture. Animals were euthanized and the spine was submitted to histological evaluation with a score system (ranging from zero to 3) for inflammation, neovascularization and fibrosis. Results Fibrosis was significantly different between simple suture and silicon mesh (p=0.005) and between simple suture and mesh with suture (p=0.015), showing that fibrosis is more intense when a foreign body is used in the repair. Bovine membrane was significantly different from mesh plus suture (p=0.011) regarding vascularization. Inflammation was significantly different between simple suture and bovine collagen membrane. Conclusion Silicon mesh, compared to other commercial products available, is a possible alternative for dural repair. More studies are necessary to confirm these findings.

RESUMO Objetivo : Avaliar reação inflamatória, fibrose e neovascularização da reparação da lesão dural em ratos Wistar, comparando quatro diferentes técnicas: pontos simples, membrana de colágeno bovino, tela de silicone e tela de silicone associada a pontos simples. Métodos : Trinta ratos Wistar foram randomizados em cinco grupos: o primeiro foi um grupo controle, submetido somente à durotomia. Os outros também foram submetidos à durotomia, porém sofreram sutura simples, reparo com membrana de colágeno bovino, tela de silicone e tela de silicone com sutura. Os animais foram sacrificados, e a coluna foi submetida à avaliação histológica com um escore (variando de zero a 3) para inflamação, neovascularização e fibrose. Resultados : A fibrose foi significativamente diferente, comparando-se sutura simples e tela de silicone (p=0,005) e sutura simples e tela com fio de sutura (p=0,015), demonstrando que a fibrose foi mais intensa quando um corpo estranho foi utilizado na reparação. Membrana bovina foi significativamente diferente da tela mais sutura (p=0,011) em relação à vascularização. A inflamação foi significativamente diferente entre os grupos submetidos à sutura simples e ao reparo com membrana de colágeno bovino. Conclusão : A tela de silicone, comparada com produtos similares com disponibilidade comercial, é uma possível alternativa como protetor de dura-máter. Mais estudos são necessários para comprovar esses resultados.

Immunohistochemical study of the canonical and non-canonical Wnt signaling pathway in colorectal carcinoma and non-neoplastic mucosa / Estudo imunoistoquímico da via de sinalização canônica e não canônica da proteína Wnt em carcinoma colorretal e em mucosa não neoplásica

Colorectal cancer is linked to several signaling pathways such as Wnt pathway. Our objective is to detect and verify the integrity of protein members of Wnt signaling pathway in colorectal carcinoma and non-neoplastic colorectal tissue. Sixty-four patients with colorectal carcinoma provided samples of colorectal neoplasia and non-neoplastic tissues, which were prepared in tissue microarray blocks and subjected to immunohistochemical analysis. The primary antibodies used were Wnt-1, Wnt-2, Wnt-5a Frizzled-1, Frizzled-5 and axin. Immunoexpression of Wnt-2 protein was significantly lower in colorectal tumor tissue and axin protein immunoexpression was significantly higher in tumor tissue. There was no significant difference in the expression of Wnt-1, Wnt-5a, Frizzled-1 and Frizzled-5 proteins in both tissues. The higher expression of Wnt-2 protein in non-neoplastic colorectal tis- sue suggests the participation during the hyperproliferative stage of colorectal mucosa. The increased axin protein immunoexpression in colorectal tumor suggests a decrease in the formation of the beta-catenin destructor complex. (AU)

O câncer colorretal está ligado a várias vias de sinalização, como a via Wnt. Nosso objetivo é detectar e verificar a integridade das proteínas da via de sinalização Wnt no carcinoma colorretal e no tecido colorretal não neoplásico. Sessenta e quatro pacientes com carcinoma colorretal forneceram amostras de neoplasia e tecidos não neoplásicos, que foram colocadas em blocos de tissue microarray e submetidas à análise imuno-histoquímica. Os anticorpos primários utilizados foram Wnt-1, Wnt-2, Wnt-5a Frizzled-1, Frizzled-5 e axina. A imunoexpressão da proteína Wnt-2 foi significativamente menor no tecido tumoral e a imunoexpressão da proteína axina foi significativamente superior no tecido do tumor. Não houve diferença significativa na expressão de Wnt-1, Wnt-5a, frizzled-1 e nas proteínas Frizzled 1 e 5 em ambos os tecidos. A maior expressão de Wnt-2 da proteína no tecido colorretal não neoplásico sugere a participação desta proteína durante o estágio de hiperproliferação da mucosa colorretal. O aumento da imunoexpressão da proteína axina no tumor colorretal sugere uma diminuição na formação do complexo de destruição da proteína beta-catenina. (AU)

Cells involved in extracellular matrix remodeling after acute myocardial infarction / Células envolvidas no remodelamento da matriz extracelular após infarto agudo do miocárdio

Objective Evaluate the effects of VEGF165 gene transfer in the process of remodeling of the extracellular matrix after an acute myocardial infarct. Methods Wistar rats were submitted to myocardial infarction, after the ligation of the left descending artery, and the left ventricle ejection fraction was used to classify the infarcts into large and small. The animals were divided into groups of ten, according to the size of infarcted area (large or small), and received or not VEGF165 treatment. Evaluation of different markers was performed using immunohistochemistry and digital quantification. The primary antibodies used in the analysis were anti-fibronectin, anti-vimentin, anti-CD44, anti-E-cadherin, anti-CD24, anti-alpha-1-actin, and anti-PCNA. The results were expressed as mean and standard error, and analyzed by ANOVA, considering statistically significant if p≤0.05. Results There was a significant increase in the expression of undifferentiated cell markers, such as fibronectin (protein present in the extracellular matrix) and CD44 (glycoprotein present in the endothelial cells). However, there was decreased expression of vimentin and PCNA, indicating a possible decrease in the process of cell proliferation after treatment with VEGF165. Markers of differentiated cells, E-cadherin (adhesion protein between myocardial cells), CD24 (protein present in the blood vessels), and alpha-1-actin (specific myocyte marker), showed higher expression in the groups submitted to gene therapy, compared to non-treated group. The value obtained by the relation between alpha-1-actin and vimentin was approximately three times higher in the groups treated with VEGF165, suggesting greater tissue differentiation. Conclusion The results demonstrated the important role of myocytes in the process of tissue remodeling, confirming that VEGF165 seems to provide a protective effect in the treatment of acute myocardial infarct. .

Objetivo Avaliar os efeitos da transferência gênica do VEGF165 no processo de remodelamento da matriz extracelular após infarto agudo do miocárdio. Métodos Ratos Wistar foram submetidos ao infarto do miocárdio por ligação da artéria coronária descendente esquerda, e a fração de ejeção de ventrículo esquerdo foi utilizada para classificar os infartos em grandes e pequenos. Os animais foram divididos em grupos de dez animais, de acordo com o tamanho do infarto (grande ou pequeno), e receberam ou não tratamento com o VEGF165. A avaliação dos diferentes marcadores foi realizada por imuno-histoquímica e quantificação digital. Os anticorpos primários utilizados foram antifibronectina, antivimentina, anti- CD44, anti-E-caderina, anti-CD24, anti-alfa-1-actina e anti-PCNA. Os resultados foram representados como média e erro padrão, e analisados por ANOVA, sendo considerado estatisticamente significativo se p≤0,05. Resultados Houve aumento significativo da expressão de marcadores de células indiferenciadas, como fibronectina (proteína presente na matriz extracelular) e CD44 (glicoproteína presente nas células endoteliais). Entretanto, houve diminuição da expressão de vimentina e PCNA, indicando possível diminuição do processo de proliferação celular após o tratamento com VEGF165. Os marcadores de células diferenciadas, E-caderina (proteína de adesão entre as células do miocárdio), CD24 (proteína presente nos vasos sanguíneos) e alfa-1-actina (marcador especifico de miócitos) também apresentaram maior expressão nos grupos submetidos à terapia gênica, comparativamente com o grupo não tratado. O valor obtido pela relação entre alfa-1-actina e vimentina foi aproximadamente três vezes maior nos grupos tratados com VEGF165, indicando maior diferenciação tecidual. Conclusão O papel dos miócitos se mostrou importante no processo de remodelamento tecidual, confirmando que o VEGF165 parece conferir um efeito protetor no tratamento do infarto agudo do miocárdio. .

Imunoexpressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) nos tecidos neoplásicos e adjacentes do carcinoma colorretal esporádico / Immunoexpression of the receptor epidermal growth factor receptor (EGFR) in tumor tissues and adjacents fron sporadic colorectal carcinoma

INTRODUÇÃO: O estudo da imunoexpressão tecidual do receptor do fator de crescimento epitelial (EGFR) pode contribuir para o entendimento de seu papel no prognóstico do carcinoma colorretal. OBJETIVO: Analisar a expressão imuno-histoquímica do EGFR no carcinoma colorretal e nos tecidos da transição tumor-mucosa e da mucosa adjacente à neoplasia. MÉTODOS: Em 40 pacientes com carcinoma colorretal operados com intenção curativa, estudou-se a imunoexpressão do EGFR com anticorpo monoclonal anti-EGFR. Foram utilizados testes paramétricos e não paramétricos. RESULTADOS: A imunoexpressão do EGFR nas amostras de tumor apresentou diferença significante em relação ao nível de imunoexpressão em espécimes de tecido da transição tumor/mucosa (p=0,01) e no nível de imunoexpressão em tecidos da mucosa adjacente (p=0,04). CONCLUSÃO: O EGFR apresentou maior imunoexpressão na mucosa do carcinoma colorretal em comparação à expressão no epitélio de transição e na mucosa adjacente não neoplásica.

INTRODUCTION: The study of tissue immunostaining epidermal growth factor receptor (EGFR) may contribute to the understanding of its role in the prognosis of colorectal carcinoma. OBJECTIVE: To analyze the immunohistochemical expression of EGFR in colorectal carcinoma tissues and in tumor-mucosa and adjacent mucosal tissues to neoplasia METHOD: The expression of EGFR with an anti-EGFR monoclonal antibody was immunohistochemically assessed in colorectal tissue samples from 40 patients with colorectal sporadic adenocarcinoma operated on with curative intent. Parametric and non-parametric tests were used. RESULTS: The immunohistochemical expression of EGFR in tumor samples showed a significant difference in the level of immunostaining in tissue specimens of transitional tumor/mucosa (p=0.01) and the level of immunoreactivity in tissues of the adjacent mucosa (p=0.04). CONCLUSION: The EGFR showed greatest expression in the mucosa of colorectal carcinoma than in the transitional epithelium and in adjacent non-neoplastic mucosa.

Immunohistochemical expression of the epidermal growth factor receptor (EGFR) in colorectal carcinoma: relation with clinicopathological parameters

Introduction: The study of tissue immunostaining of the epidermal growth factor receptor (EGFR) may contribute with the understanding of its role in the prognosis of colorectal carcinoma. Objective: To analyze the immunohistochemical expression of EGFR in colorectal carcinoma tissues and transitional tumor-mucosa and mucosa adjacent to neoplasia, and its relation with cancer. Method: The study was conducted with 40 patients with colorectal carcinoma who had surgery with curative intent in order to analyze the immunoexpression of EGFR with anti-EGFR. We used parametric and nonparametric tests. Results: The immunohistochemical expression of EGFR in tumor samples showed a significant difference as to the level of immunostaining in tissue specimens of transitional tumor-mucosa (p=0.01) and the level of immunoreactivity in tissues of the adjacent mucosa (p=0, 04). The immunoexpression of EGFR showed no significant relation with the size of the tumor, angiolymphatic invasion, neural invasion, cellular differentiation, level of carcinoma infiltration in the intestinal wall, lymph node metastases and liver metastases. Conclusions: The EGFR showed a more intense expression in the mucosa of colorectal carcinoma than in the transitional epithelium and adjacent non-neoplastic mucosa. The immunoexpression of EGFR did not correlate with pathological parameters of colorectal carcinoma and liver metastases. (AU)

Introdução: O estudo da imunoexpressão tecidual do receptor do fator de crescimento epitelial (EGFR) pode contribuir para o entendimento de seu papel no prognóstico do carcinoma colorretal. Objetivo: Analisar a expressão imuno-histoquímica do EGFR no carcinoma colorretal e nos tecidos da transição tumor-mucosa e da mucosa adjacente à neoplasia, e avaliar a relação com os aspectos anatomopatológicos da neoplasia. Método: Em 40 doentes com carcinoma colorretal operados com intenção curativa, estudou-se a imunoexpressão do EGFR com anticorpo anti-EGFR. Foram utilizados testes paramétricos e não paramétricos. Resultados: A imunoexpressão do EGFR nas amostras de tumores apresentou diferença significante, em relação ao nível de imunoexpressão em espécimes de tecido da transição tumor-mucosa (p=0,01), e ao nível de imunoexpressão em tecidos da mucosa adjacente (p=0,04). A imunoexpressão do EGFR não apresentou relação significante com o tamanho da neoplasia, invasão angiolinfática, invasão neural, grau de diferenciação celular, nível de infiltração do carcinoma na parede intestinal, acometimento linfonodal e metástase hepática. Conclusões: O EGFR apresentou maior imunoexpressão na mucosa do carcinoma colorretal do que no epitélio de transição e na mucosa adjacente não neoplásica. A imunoexpressão do EGFR não se relacionou com os parâmetros anatomopatológicos do carcinoma colorretal e com a presença de metástase hepática. (AU)

Níveis séricos e imunoexpressão tecidual do marcador CA 19-9 no carcinoma colorretal e comprometimento linfonodal / Serum levels and tissue immunoexpression of CA 19-9 marker incolorectal carcinoma and lymph node involvement

Introdução: O carcinoma colorretal é uma das neoplasias mais incidentes nos países ocidentais. É controverso se os níveis séricos e a imunoexpressão tecidual do marcador tumoral CA 19-9 estão relacionados com o comprometimento linfonodal e com a invasão linfática no carcinoma colorretal. Casuística e métodos: Em 45 pacientes com carcinoma colorretal operados, o nível de CA19-9 pré-operatório e a imunoexpressão do CA19-9 no tecido neoplásico foram analisados. Valores de CA19-9 ? 37 UI/ml foram considerados aumentados. As amostras do tecido com carcinoma colorretal foram submetidas ao estudo imunoistoquímico, com anticorpo monoclonal anti-CA19-9. A intensidade de expressão do CA19-9 na neoplasia foi semiquantificada em leve (+/+++), moderada (++/+++), intensa (+++/+++) ou ausente. Foram comparados os níveis séricos e a imunoexpressão tecidual do marcador CA19-9 com o comprometimento linfonodal e a invasão linfática. Resultados: O nível sérico e a imunoexpressão tecidual do CA19-9 não se relacionaram significantementecom o comprometimento linfonodal (p = 0,49 e p = 0,45, respectivamente) ou com a invasão linfática (p = 0,12 e p = 0,74, respectivamente). Conclusões: O nível sérico e a imunoexpressão tecidual do CA19-9 não refletem o comprometimento linfonodal e a presença de invasão linfática no carcinoma colorretal.

Introduction: Colorectal carcinoma is one of the most common tumors in Western countries. It is controversial whether serum and tissue immunohistochemical expression of tumor marker CA 19-9 are associated with lymph node involvement or lymphatic invasion in colorectal carcinoma. Methods: In 45 patients with colorectal carcinoma operated, the preoperative serum levels and immunoexpression of CA19-9 in tumor tissues were performed. Values of CA19-9 ? 37 UI/ml were considered increased. Tissue samples with colorectal carcinoma were subjected to the immunohistochemistry study, with monoclonal antibody anti-CA19-9. The severity of CA19-9 expression in the tumor was semiquantified as mild (+/+++), moderate (++/+++), intense (+++/+++), or absent. We compared the serum levels and the tissue immunoexpression of CA19-9 marker with lymph node and lymphatic invasion. Results: Serum level and tissue immunoexpression of CA19-9 did not correlate significantly with lymph node involvement (p = 0.49 and p = 0.45, respectively) or with lymphatic invasion (p = 0.12 and p = 0.74, respectively). Conclusions: The serum level and tissue immunoexpression of CA19-9 do not reflect the presence of lymph node involvement and the presence of lymphatic invasion in colorectal carcinoma.

Contribuição da tomografia helicoidal no estadiamento pré-operatório do carcinoma gástrico / Contribution of abdominal helical tomography in the preoperative staging of gastric carcinoma

Objetivo: Analisar a sensibilidade da tomografia helicoidal abdominal na detecção do comprometimento linfonodal e de metástases hepáticas e peritoneais no estadiamento pré-operatório do carcinoma gástrico. Método: Foram estudados retrospectivamente 52 doentes operados por carcinoma gástrico e estadiados por tomografia helicoidal abdominal com contraste oral e intravenoso. Os resultados baseados nos laudos correspondentes foram correlacionados com os achados intraoperatórios e exame anatomopatológico dos espécimes cirúrgicos. Resultados: A neoplasia gástrica localizou-se na região do antropilórica em 38 (73,1%) doentes, na cárdia em 8 (15,4%) e no corpo e fundo em 6 (11,5%). A tomografia helicoidal abdominal detectou lesão gástrica em 25 (48,1%) doentes, metástases hepáticas em 6 (11,5%), acometimento de linfonodos em 5 (9,6%), ascite em 4 (7,7%) e comprometimento no fígado, baço e pâncreas em 1 (1,9%). Na laparotomia, constataram-se metástases hepáticas em 6 (11,5%) doentes e ascite em 12 (23,1%). Nos doentes submetidos à ressecção com intenção curativa da neoplasia, foram identificados pela tomografia helicoidal abdominal pré-operatória 27 (67,5%) linfonodos sugestivos de comprometimento. O exame anatomopatológico mostrou 16 (40,0%) doentes com linfonodos infiltrados pelo carcinoma gástrico. A sensibilidade do exame de tomografia helicoidal abdominal na identificação pré-operatória da lesão gástrica foi 48,1%, para linfonodos acometidos foi de 18,5% e para metástases hepáticas a sensibilidade foi 100,0%. Treze (25%) doentes apresentaram metástases peritoneais não reveladas pela tomografia helicoidal. Conclusões: O exame de tomografia computadorizada helicoidal abdominal no pré-operatório do carcinoma gástrico apresentou sensibilidade elevada na detecção de metástases hepáticas, sensibilidade baixa na detecção do comprometimento linfonodal pela neoplasia e não foi capaz de identificar metástases peritoneais.

Objective: To analyze the sensitivity of preoperative abdominal helical tomography of gastric carcinoma in detecting lymph node compromise and hepatic and peritoneal metastases. Method: We examined retrospectively 52 patients with gastric carcinoma who had undergone surgery. Patients were staged in according to the findings using abdominal helical tomography with oral and intravenous contrast. Results of pre-operative abdominal tomography correlated with intra-operative findings and anatomopathological results. Results: Gastric neoplasia was located in the antropyloric region in 38 patients (73.1%), in the cardia region in 8 (15.4%), and in the body and fundus in 6 (11.5%). Abdominal tomography detected gastric lesions in 25 patients (48.1%), revealed hepatic metastases in 6 (11.5%), lymph node invasion in 5 (9.6%), ascitis in 4 (7.7%), and neoplastic infiltration in the liver, spleen, and pancreas in 1 (1.9%). Laparotomy detected hepatic metastases in 6 (11.5%) patients and ascitis in 12 (23.1%). Among the patients submitted to curative resection, 27 (67.5%) were identified as having lymph nodes compromised on preoperative abdominal tomography. Anatomopathological examination of the operative specimen showed that 16 patients (40.0%) had lymph nodes invaded by carcinoma. The sensitivity of pre-operative abdominal tomography exams in identifying gastric lesion was 48.1, 18.5% for invaded lymph nodes, and 100.0% for hepatic metastases. Although 13 (25%) patients presented peritoneal metastases intra-operatively, the abdominal tomography exams did not reveal such lesions. Conclusions: Exams of the gastric carcinoma presented high sensitivity in detecting hepatic metastases, low sensitivity in detecting lymph node invasion by neoplasia, and inability to identify peritoneal metastases.

Níveis séricos pré-operatórios dos marcadores CEA e CA19-9 e imunoexpressão tecidual do marcador CA19-9 no carcinoma colorretal: relação com os aspectos morfológicos da neoplasia / Pre-operative sera levels of CEA and CA19-9 and tissular distribution of tumor marker CA19-9 in colorectal carcinoma: correlation with morphological features of neoplasia

OBJETIVO: Comparar os níveis séricos de CA19-9 e CEA e a expressão tecidual do CA19-9 e relacioná-los com os aspectos morfológicos do carcinoma colorretal. MÉTODOS: Quarenta e cinco pacientes com carcinoma colorretal foram operados com coleta de CEA e CA19-9 séricos pré-operatórios. Valores séricos de CEA = 5,0ng/mL e de CA19-9 = 37UI/mL foram considerados aumentados. A avaliação da imunoexpressão do CA19-9 no tecido neoplásico foi realizada por meio de estudo imunoistoquímico com anticorpo monoclonal anti-CA19-9. A intensidade de expressão do CA19-9 no tecido neoplásico foi semiquantificada em leve(+/+++), moderada(++/+++), intensa(+++/+++) e ausente. RESULTADOS: Os valores do CA19-9 sérico foram progressivamente maiores conforme o aumento da expressão do CA19-9 no tecido neoplásico, porém sem significância (p=0,06). O aumento do nível sérico do CA19-9 foi acompanhado de elevação significante (p<0,001) do nível sérico do CEA. O nível sérico do CA19-9, a imunoexpressão tecidual do CA19-9 e o nível sérico do CEA não apresentaram associação significante com características morfológicas do carcinoma colorretal. CONCLUSÃO: As expressões sérica e tissular do CA19-9 demonstraram relação diretamente proporcional entre si, enquanto que os aspectos morfológicos da neoplasia não tiveram influência no CEA e CA19-9 séricos ou na imunoexpressão do CA19-9 tissular.

OBJECTIVE: To compare sera levels of CEA and CA19-9 and tissular expression of the CA19-9 and to correlate these with morphological features of the colorectal carcinoma. METHODS: Forty five patients with colorectal carcinoma underwent surgical treatment following measurement of pre-operative levels of CA19-9 and CEA. Sera levels of CEA = 5.0ng/ml and CA19-9 = 37UI were deemed high values. Evaluation of CA19-9 immunoexpression in neoplastic tissue was carried through by means of immunohistochemical study with monoclonal antibody anti-CA19-9. The intensity of expression of CA19-9 in neoplastic areas was semi-quantified in each area of tumor differentiation into mild(+/+++), moderate(++/+++), intense(+++/+++) or absent. RESULTS: Sera CA19-9 values were progressively higher in the presence of elevated CA19-9 immunoexpression in colorectal carcinoma tissue, although not significant (p=0.06). Increased sera CA19-9 levels were found to be associated with significantly elevated (p<0.001) sera CEA levels. Levels of sera CA19-9, tissular immunoexpression of CA19-9 and sera levels of CEA presented no significant association with morphological features of the colorectal carcinoma. CONCLUSION: Sera and tissular levels of the CA19-9 marker exhibited, each other, a directly proportional relationship. The morphological features of the neoplasia had no influence on sera CEA or CA19-9 levels or tissular immunoexpression of CA19-9.

Somatostatinoma de duodeno: relato de caso e revisão da literatura / Duodenal somatostatinoma: case report and literature review

Introdução: Somatostatinomas são tumores carcinóides produtores de somatostatina, localizados principalmente na cabeça do pâncreas e duodeno. A importância desse relato deve-se à raridade deste subtipo histológico. Relato de Caso: Mulher, 68 anos, portadora de diabetes mellitus há dois anos, com queixa de dor abdominal há cinco meses. Ao exame físico notava-se massa em epigástrio e hipocôndrio direito, fixa e dolorosa à palpação. A ultra-sonografia e a tomografia computadorizada de abdome evidenciaram, respectivamente, colelitíase e tumor sólido em topografia de cabeça de pâncreas, medindo cerca de 12 x 8 cm. A paciente foi submetida a procedimento cirúrgico, no qual foi encontrado um grande tumor envolvendo o duodeno e o pâncreas, optando-se pela gastroduodenopancreatectomia cefálica e colecistectomia. Os exames anátomo-patológico e imuno-histoquímico da peça operatória revelararam tratar-se de um somatostatinoma de duodeno (estadiamento: T4N0Mx). A paciente apresentou boa evolução no pós-operatório, e com 18 meses da cirurgia encontra-se sem sinais de recidiva tumoral. Discussão: Os somatostatinomas são tumores raros, geralmente malignos, mais freqüentemente encontrados no pâncreas, sendo que apenas 2,5% deles são funcionantes. O diagnóstico é realizado por exame anátomo-patológico e imuno-histoquímico e o tratamento de escolha é a ressecção cirúrgica. Quando a cirurgia curativa não pode ser realizada, alguns pacientes podem se beneficiar de procedimentos paliativos e/ou quimioterapia. O seguimento deve ser realizado a cada seis meses com tomografia abdominal e a dosagem sérica de somatostatina pode ser um método complementar. A sobrevivência em cinco anos após a retirada completa do tumor e na ausência de linfonodos comprometidos ou metástases chega a 100%.

Introduction: Somatostatinomas are rare somatostatin-producing carcinoid tumors, mainly found in the duodenum and pancreatic head. The importance of this case report lies in the rarity of such histological subtype. Case Report: Sixty-eight years old female patient with a two-year diabetes history and five-month abdominal pain complaint. Physical examination revealed a tumor in the epigastrium and right hypochondrium, immovable and painful upon palpation. Ultrasound and abdominal computerized tomography showed, respectively, calculous chronic cholecystitis and solid tumour, measuring approximately 12 x 8 cm, located in pancreatic head topography. The patient was submitted to surgery in which a large tumor was found evolving duodenum and pancreas. Cephalic gastroduodenopancreatectomy and cholecistectomy were performed. The anatomopathological and immunohistochemical study of the surgical piece revealed a duodenal somatostatinoma (stage: T4N0Mx). The patient afforded good postoperative evaluation and after 18 months from surgery, presented no signs of tumor recurrence. Discussion: Somatostatinomas are rare, usually malignant tumors, more frequently found in the pancreas, and only 2.5% are functional. Diagnosis is established by anatomopathological and immunohistochemical exams and the chosen treatment is surgical resection. When curative surgery cannot be performed, some patients may benefit from palliative surgery and/or chemotherapy. Follow-up must take place every six months with abdominal tomography and serum somatostatin dosage could be a complementary method. The five-year survival rate is 100% upon complete tumor resection with the absence of affected lymph nodes or metastasis.

Recidiva local de adenocarcinoma gástrico após gastrectomia total: a propósito de um caso com recidiva tardia e revisão da literatura / Local recurrence of gastric adenocarcinoma after radical gastrectomy: report of a case with late recurrence and review of the literature

Os autores relatam um caso de paciente portador de adenocarcinoma gástrico que foi submetido a uma gastrectomia total. Após três anos, apresentou recidiva logo abaixo da linha de sutura. Foi reoperado, e realizada ressecção com intenção curativa. Cinco anos após a segunda operação, o paciente encontrava-se assintomático e sem sinais de recorrência da doença. O adenocarcinoma é o tumor maligno mais comum do estômago e o tratamento consiste na ressecção cirúrgica. A recidiva local de adenocarcinoma gástrico indica que a ressecção cirúrgica não foi bem sucedida. A freqüência da recidiva local na literatura é variável, de 10 a 36%, e é influenciada pela localização do tumor, presença de margem de ressecção comprometida e extensão da margem de segurança. O diagnóstico da recidiva é feito pela história clínica e exames complementares. A abordagem cirúrgica apresenta, na maioria das vezes, resultados insatisfatórios. O intervalo livre de doença está diretamente relacionado com a ressecabilidade. O prognóstico depende do estadiamento do tumor, do tratamento cirúrgico e do intervalo livre de doença.

The autors report a case of a patient with gastric adenocarcinoma treated with total gastrectomy. Three years later, presented recurrence below the anastomosis line. Re-explorationand resection with curative purpose were done. Five years after the second surgical resection, the pacient has nosymptoms and no recurrence sign of disease. Adenocarcinoma is the most common malignant gastric tumor and itstreatment is surgical resection. Local recurrence of gastric adenocarcinoma denotes that surgical resection was notsuccessful. The rate in literature varies from 10 to 36% and is influenced by tumor location, resection margin involved by disease and tumor-free margin extension. Recurrence diagnosis is based on clinical history and complementary exams. The major surgical approach has unsatisfying results. The median disease-free interval is straightly related to resecability. Prognosis of gastric adenocarcinoma local recurrence depends on tumor staging, surgical treatment and disease-free interval.

Estudo clínico-patológico, da proliferação celular e da apoptose no adenocarcinoma gástrico da cárdia / Analysis of clinicopathological, tumor cell proliferation and apoptosis parameters in adenocarcinoma of the gastric cardia / Analysis of clinicopathological, tumor cell proliferation and apoptosis parameters in adenocarcinoma of the gastric cardia

RACIONAL/OBJETIVO: Em vista do aumento na incidência do carcinoma da cárdia nos últimos anos, este trabalho visa estudar os aspectos clínico-patológicos, da proliferação celular e da apoptose tumorais, suas correlações e eventuais influências no seu prognóstico. MATERIAL E MÉTODO: Estudaram-se 40 doentes submetidos a gastrectomia total por carcinoma da cárdia, no período de 1988 a 2001, com seguimento clínico de no mínimo 3 anos. Excluíram-se aqueles com tratamento químio ou radioterápico prévio, neoplasia precoce, óbito no intra-operatório ou por outras causas não relacionadas ao câncer. Analisou-se sexo, idade, tipo histológico de Laurén, padrão de crescimento tumoral de Ming, estádio e presença ou ausência de metaplasia intestinal e/ou Helicobacter pylori na mucosa adjacente. O índice apoptótico foi avaliado por cortes histológicos corados pela hematoxilina-eosina. O índice de proliferação celular foi avaliado por meio da imunoexpressão ao PCNA, sendo a técnica imunoistoquímica utilizada a da estreptoavidina-biotina-peroxidase. Para análise da sobrevida, excluíram-se os casos com metástase à distância ao diagnóstico. Foram utilizados testes t de Student, de Mann-Whitney, curvas de Kaplan-Meier e modelo de regressão de Cox. O nível de significância adotado foi menor de 0,05. RESULTADOS: A idade média foi de 61 anos (mediana: 63); houve predomínio do sexo masculino (72,5 por cento), tipo histológico difuso (55 por cento) e infiltrativo (72,5 por cento) e de estádios mais avançados (III e IV: 67,5 por cento). Não houve associação com metaplasia intestinal e/ou H. pylori. O índice apoptótico médio foi de 7,05 em 10 campos consecutivos de grande aumento e de 11,40 em 500 células (2,28 por cento). A positividade média ao PCNA foi de 275,05 células em 10 campos consecutivos de grande aumento e de 409,33 em 500 células (81,9 por cento). Houve correlação positiva do tipo histológico intestinal com PCNA e com a apoptose em 10 campos consecutivos de grande aumento e de ...

BACKGROUND/AIMS: In view of the increased incidence of carcinoma of the cardia over recent years, this work had the aim of studying the clinicopathological aspects, cell proliferative and tumor apoptotic indices of this neoplasm, their interrelations and possible influences on the prognosis. MATERIAL AND METHODS: Forty cases of adenocarcinoma of the cardia were studied between 1988 and 2001, with a minimum clinical follow-up of 3 years. Patients were excluded if they had previous chemotherapy or radiotherapy treatment, presented early neoplasia, or died during the operations or for other reasons unrelated to cancer. Gender; age, Laurén and Ming histological type, staging, and the presence or absence of intestinal metaplasia, epithelial dysplasia and Helicobacter pylori in the adjacent mucosa were analyzed. The apoptotic index was evaluated via hematoxylin-eosin in the primary tumor. To analyze the cell proliferation tumor, PCNA was utilized. The immunohistochemical technique utilized was streptavidin-biotin-peroxidase. For the survival analysis, cases with distant metastasis upon diagnosis were excluded. For the statistical analysis, the Student t and Mann-Whitney tests, Kaplan-Meier curves and Cox regression model were utilized. RESULTS: The mean age was 61 years (median: 63). There was predominance of the male gender (72.5 percent), diffuse histological type (55 percent) and infiltrative histological type (72.5 percent), and the more advanced stages (III and IV: 67.5 percent). There was no association with intestinal metaplasia and/or H. pylori. No epithelial dysplasia was detected in adjacent mucosa in any of the cases. The mean apoptotic index was 7.05 in 10 high power fields and 11.40 in 500 cells (2.28 percent). The mean positivity to PCNA was 275.05 cells in ten high power fields and 409.33 in 500 cells (81.9 percent). There was a positive correlation between the cell proliferative and apoptotic indices. There was a positive correlation for intestinal ...

Estudo clínico-patológico, da angiogênese, proliferação celular da apoptose no adenocarcinoma gástrico da cárdia / Clinicopathological study, of angiogenesis, cell proliferation and apoptose in adenocarcinoma of gastric cardia

Objetivo: Em vista do aumento na incidência do carcinoma da cárdia nos últimos anos, este trabalho visou estudar os aspectos clínico-patológicos, a angiogênese, proliferação celular e apoptose tumorais, suas correlações entre si e eventuais influências no prognóstico. Métodos: Estudaram-se 40 casos de adenocarcinoma avançado da cárdia, no período de 1988 a 2001, com seguimento clínico de no mínimo 3 anos. Excluíram-se os doentes com tratamento quimio ou radioterápico prévio, óbito no intra-operatório ou por outras causas não relacionadas ao câncer. Analisaram-se o sexo, idade, tipo histológico de Laurén e Ming, invasão perineural, vascular sanguínea e linfática, estadiamento; a presença ou ausência de metaplasia intestinal, displasia epitelial e Helicobacter pylori na mucosa adjacente. O índice apoptótico foi avaliado ao HE, no tumor primário. A angiogênese foi avaliada pela microdensidade vascular e pela imunoexpressão ao VEGF, tanto no tumor primário, como na metástase linfonodal. Para a análise da proliferação celular, utilizou-se o PCNA, no tumor primário. Foram considerados VEGF-positivos os tumores com imunoexpressão maior a 5 por cento de células. A técnica imunoistoquímica utilizada foi a estreptoavidina-biotina-peroxidase. Para análise da sobrevivência excluíram-se os casos com metástase à distância ao diagnóstico. Para a estatística foram utilizados testes t de Student e de Mann Whitney, curvas de Kaplan-Meier e Modelo de regressão de Cox., sendo que o nível de significância adotado foi menor a 0,05. Resultados: A idade média foi de 61 anos (mediana:63) com predomínio do sexo masculino (72,5 por cento), tipo histológico difuso (55 por cento) e infiltrativo (72,5 por cento) e de estádios mais avançados (111 e IV: 67,5 por cento). O tipo difuso mostrou maior número de invasão perineural (65 por cento) e...